Curso : Experto en Ensayos Microbiológicos

UNIDAD DIDÁCTICA 1. INTRODUCCIÓN A LA MICROBIOLOGÍA

1. Introducción a la Microbiología
2. Definiciones y autores principales
3. Laboratorios Microbiológicos
4. Conceptos relacionados
5. Principios de taxonomía bacteriana y evolución

- La importancia del conocimiento de la evolución en Microbiología

- Condiciones físico-químicas de la Tierra primitiva

- Los organismos primitivos

- El origen de la célula eucariota

- Relaciones filogenéticas entre los microorganismos

UNIDAD DIÁCTICA 2. EL LABORATORIO MICROBIOLÓGICO

1. El laboratorio como lugar de trabajo
2. Identificación de materiales y equipos usuales

- Clasificación de los materiales

3. Clasificación de los agentes biológicos
4. Buenas prácticas de laboratorio
5. Laboratorio básico
6. Técnicas de laboratorio
7. Niveles de seguridad
8. Normas de seguridad en microbiología
9. Vías de infección
10. Higiene en el trabajo del laboratorio microbiológico
11. Limpieza y eliminación del material
12. Residuos infecciosos
13. Tratamiento de residuos infecciosos
14. Teoría microbiana de la enfermedad
15. Microorganismos patógenos

UNIDAD DIDÁCTICA 3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS BÁSICOS DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

1. Materiales de laboratorio

- Materiales de vidrio

- Materiales de plástico

- Materiales de porcelana

2. Instrumentos y aparatos del laboratorio

- Balanzas

- Centrífugas

- Instrumental de corte

- Instrumental de disección

- Instrumental de hemostasia

- Instrumental de talla o campo

- Instrumental de sutura

- Utensilios básicos de laboratorio

3. Material volumétrico

- Probeta

- Pipeta

- Bureta

- Matraz aforado

4. Equipos automáticos

- Automatización en el procesamiento de las muestra

- Equipamiento básico del laboratorio de hematología

5. Reactivos químicos y biológicos

- Equipos de reactivos

UNIDAD DIDÁCTICA 4. MICROSCOPÍA

1. Microscopio
2. Tipos de microscopios
3. Funcionamiento del microscopio
4. Características que definen a un microscopio
5. Aberraciones
6. Microscopio óptico
7. Normas generales de uso
8. Manejo de objetivos
9. Normas de uso utilizando el objetivo de inmersión
10. Mantenimiento y precauciones de uso
11. Microscopios electrónicos
12. Otros tipos de microscopios

UNIDAD DIDÁCTICA 5. MICROORGANISMOS RELACIONADOS CON LOS PROCESOS INFECCIOSOS

1. Características principales de los microorganismos
2. Tipos de microorganismos

- Cocos gram positivos y negativos

- Bacilos gram positivos

- Bacilos gram negativos

- Bacilos gram negativos exigentes

- Bacterias anaerobias

- Micobacterias

- Hongos

- Virus

- Parásitos

UNIDAD DIDÁCTICA 6. PREPARACIONES MICROSCÓPICAS

1. Confección de preparaciones
2. Preparaciones vitales
3. Preparación de gota pendiente
4. Tinción negativa
5. Coloraciones vitales
6. Tinción simple
7. Tinción de Gram
8. Tinción de Ziehl-Neelsen
9. Tinción de flagelos
10. Tinción de cápsulas
11. Tinción de esporas
12. Otras tinciones

UNIDAD DIDÁCTICA 7. LIMPIEZA Y ESTERILIZACIÓN

1. Términos de uso más frecuente
2. Limpieza del material de vidrio

- Material nuevo

- Material usado

3. Algunos agentes microbicidas y microbiostáticos
4. Factores que afectan a la esterilización y a la desinfección
5. Termodestrucción
6. Esterilización por medio de calor seco
7. Esterilización por medio de calor húmedo

- Técnicas de esterilización por calor húmedo

8. Esterilización por filtración
9. Esterilización por radiaciones
10. Desinfectantes químicos
11. Pruebas de esterilidad de los equipos de laboratorio

- Controles físicos

- Controles químicos

- Controles biológicos

12. Evaluación de desinfectantes

- Coeficiente fenólico

- Recuento en placa

- Filtración por membrana

- Técnica de dilución en tubo

- Susceptibilidad microbiana

13. Antimicrobianos
14. Antibióticos
15. Resistencia microbiana

- Mecanismos de resistencia de las bacterias

16. Patógenos resistentes
17. Vacunas

UNIDAD DIDÁCTICA 8. MUESTREO Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

1. Muestreo
2. Requisitos de las muestras
3. Muestras líquidas
4. Muestras sólidas
5. Muestras gaseosas
6. Muestras superficiales

- Método del hisopo

- Método de la esponja

- Método de enjuague total (microbiológico)

7. Muestreos anaerobios
8. Programas de los planes de toma de muestras
9. Muestreo de alimentos

- Definiciones

- Plan de dos clases

- Plan de tres clases

- Uso de normas MIL STD 105 E

10. Elección de muestras no tomadas al azar
11. Transporte y almacenamiento

- Almacenamiento de muestras

12. Medidas de masa y volumen

- Técnicas básicas de medida de masa

- Técnicas básicas de medidas de volumen

13. Preparación de disoluciones y diluciones. Formas de expresar la concentración

- Disoluciones o soluciones

- Diluciones

UNIDAD DIDÁCTICA 9. MUESTRAS BIOLÓGICAS HUMANAS: MANIPULACIÓN Y PROCESAMIENTO

1. Tipos de muestras
2. Muestras analizables
3. Análisis cualitativo y cuantitativo
4. Determinación analítica

- Fases de la determinación analítica

- Solicitud de determinaciones analíticas

5. Perfil analítico. Batería de pruebas
6. Errores más comunes en la manipulación

- Errores de identificación

- Tipo de muestra

- Interferencias del espécimen

- Procesamiento del espécimen

- Errores derivados del almacenamiento del espécimen antes de la determinación

- Normas de seguridad en el manejo de las muestras

7. Prevención en la manipulación de la muestra
8. Características generales del procesamiento de muestras en función de las mismas

- Procesamiento de muestras para estudios bioquímicos

- Procesamiento de muestras microbiológicas

- Tratamiento general de la muestra pre-inoculación para cultivo de bacterias

- Procesamiento según el tipo de muestra

9. Requisitos mínimos para el procesamiento de la muestra

UNIDAD DIDÁCTICA 10. MEDIOS DE CULTIVO

1. Necesidades nutritivas de los microorganismos
2. Requerimientos energéticos
3. Requerimientos no energéticos
4. Constituyentes habituales de los medios de cultivo
5. Clasificación según su origen
6. Clasificación según su estado físico
7. Clasificación según su utilidad
8. Clasificación según su composición
9. La evolución de los medios de cultivo
10. Medios deshidratados
11. Preparación de los medios de cultivo
12. Determinación y ajuste del pH
13. Control de medios preparados
14. Formulación de algunos medios de cultivo usuales

- Medios no selectivos

- Medios selectivos

UNIDAD DIDÁCTICA 11. TIPOS DE CULTIVOS Y TÉCNICAS DE SIEMBRA

1. Cultivo de bacterias
2. Tipos de cultivos y sus siembras

- Siembra por estrías

- Siembra por punción

- Siembra volumétrica

- Siembra masiva

3. Manejo de las muestras y toma del inóculo
4. Cultivos en placa
5. Cultivos mediante disoluciones seriadas
6. Método de cultivo anaerobio
7. Vasijas anaerobias
8. Cultivo en atmósfera de C02
9. Características morfológicas y de cultivo de una bacteria

- Morfología bacteriana

- Características de cultivo

UNIDAD DIDÁCTICA 12. INCUBACIÓN Y CONSERVACIÓN DE CULTIVOS

1. Incubación
2. Efecto temperatura
3. Efecto tiempo
4. Conservación de cultivos
5. Mantenimiento de periodos cortos

- Refrigeración simple

- Cultivo en agar inclinado

- Cultivos en medio líquido

6. Mantenimiento en periodos largos

- Conservación en aceite

- Suspensiones en suero desecado

- Congelación

- Liofilización

7. Velocidad de crecimiento
8. Cinética de crecimiento bacteriano

- Tasa de generación

- Determinación de la tasa de generación

UNIDAD DIDÁCTICA 13. IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS

1. Análisis microbiológicos
2. Fases para la identificación de microorganismos
3. Estudio de los caracteres culturales, morfológicos y fisiológicos

- Caracteres culturales

- Caracteres morfológicos

- Caracteres fisiológicos

4. Pruebas bioquímicas para el análisis de bacterias
5. Pruebas relacionadas con proteínas, aminoácidos y otros compuestos nitrogenados; así como pruebas de actividad proteolítica

- Hidrólisis de la gelatina

- Hidrólisis de la caseína

- Hidrólisis del suero coagulado

- Producción de indol a partir de triptófano

- Producción de amoniaco a partir de la peptona o de la arginina

- Producción de ácido sulfhídrico

- Producción de amoniaco a partir de urea

- Reducción del nitrato

6. Pruebas relacionadas con los carbohidratos y otros compuestos carbonados

- Hidrólisis de almidón

- Producción de ácidos a partir de azúcares, glucósidos y alcoholes polihidroxílicos

- Diferenciación entre la oxidación y fermentación de carbohidratos

- Producción de dióxido de carbono a partir de glucosa

- Prueba del rojo de metilo

- Prueba de Voges-Proskauer

- Utilización del citrato como única fuente de carbono

- Producción de polisacárido a partir de sacarosa

- Acción de la leche tornasolada

7. Pruebas relacionadas con los lípidos

- Hidrólisis de la tributirina

- Lipólisis

- Hidrólisis de los compuestos del Tween

- Hidrólisis de la lecitina

8. Otras pruebas bioquímicas

- Prueba de la catalasa

- Prueba de la oxidasa

- Prueba de la coagulasa

- Prueba de la fosfatasa

- Hemólisis de sangre

- Prueba de la potasa

- Prueba de la motilidad

9. Métodos serológicos

- Aglutinación

- Fijación del complemento

- Técnicas de precipitación en gel

- ELISA

- Seroinhibición

10. Técnicas genéticas

- Métodos moleculares basados en ácidos nucleicos

- Métodos moleculares no basados en ácidos nucleicos

11. Galerías comerciales

- API

- BBL

12. Antibiograma

- ¿Cuándo se realiza un antibiograma?

13. Pruebas directas

- Frotis en fresco

- Tinciones

- Cultivo

- Búsqueda del antígeno

- Detección productos metabólicos

- Detección ácidos nucleicos

UNIDAD DIDÁCTICA 14. RECUENTO DE MICROORGANISMOS

1. Técnicas de recuento
2. Determinación del número de bacterias viables en una muestra

- Método de recuento de colonias

- Filtración a través de membrana

- Recuento por dilución en tubos o técnica del Número Más Probable

- Métodos de reducción del colorante

3. Determinación del número total de bacterias de una muestra

- Método de extensión de Breed

- Recuento por observación directa al microscopio

- Métodos turbidimétricos

- Cámara de recuento

4. Métodos físicos para la detección de microorganismos
5. Métodos químicos de detección de microorganismos
6. Métodos inmunológicos de detección de microorganismos

UNIDAD DIDÁCTICA 15. MICROORGANISMOS INDICADORES Y PATÓGENOS

1. Microorganismos indicadores
2. Características que deben reunir los indicadores fecales
3. Microorganismos indicadores, patógenos y toxicogénicos de estudio frecuente
4. Recuento de microorganismos aerobios mesófilos

- Recuentos

5. Recuento de coliformes

- Recuento en medio sólido

- Recuento en medio líquido

6. Recuento de Enterobacteriaceae totales

- Recuento en medio sólido

- Recuento en medio líquido

7. Recuento de estreptotococos fecales

- Recuento de Streptococcus D de Lancefield en medio sólido

- Recuento de Streptococcus D de Lancefield en medio líquido

8. Recuento de Escherichia coli

- Procedimiento de recuento

9. Recuento de Salmonella
10. Recuento de Shigella
11. Recuento de Clostridium sulfitorreductores

- Recuento de formas vegetativas y esporuladas de Clostridium sulfitorreductores, en conjunto

- Recuento de formas esporuladas de Clostridium sultitorreductores

12. Recuento de Staphylococcus aureus

- Método de enriquecimiento en tubos

- Pruebas confirmativas

13. Recuento de Bacillus cereus

- Recuento en placa

- Técnica del Número Más Probable (NMP)

14. Recuento de Clostridium botulinum

UNIDAD DIDÁCTICA 16.CONTROL DE SUPERFICIES, DEL AIRE Y DEL SUELO

1. Control microbiológico ambiental
2. Control de superficies

- Tipos de muestras

- Método del hisopo

- Método de la esponja

- Método de enjuague total (microbiológico)

3. Sistemas comerciales

- Placas Contact Plate

- Placas Count-Tact

- Probetas Easicuit

- Placas Petrifilm

- Swab Test kit

- Hy food test

- Desinfectest

4. Microorganismos estudiados
5. Control de los manipuladores de alimentos
6. Control del aire. Método de sedimentación en placas de agar
7. Otros métodos de control del aire

- Radiaciones ultravioleta

- Agentes químicos

- Filtración

- Flujo laminar

8. Evaluación del grado de contaminación del aire
9. El aire acondicionado

- Patologías y microorganismos vinculados a los sistemas de ventilación

10. El suelo como medio

- La rizosfera

- Los microorganismos en la actividad biogeoquímica

- Biodegradación

- Biorremediación

- Biotoxicidad

11. Examen microbiológico del suelo

UNIDAD DIDÁCTICA 17. CONTROL DEL AGUA

1. Calidad sanitaria del agua

- Características de las aguas residuales

- Propiedades físicas

- Propiedades químicas

- Materia inorgánica

2. Agua potable
3. Desinfección del agua potable

- Métodos de desinfección

- Desinfección por cloro y derivados

4. Factores que afectan a la cantidad y a las clases de microorganismos presentes en las aguas naturales
5. Microorganismos presentes en aguas naturales

- Bacterias indicadoras de contaminación de las aguas

6. Toma de muestras acuosas para el análisis de agua residual

- Procedimiento de muestreo de aguas

7. Toma de muestras para el análisis de agua potable

- Métodos y muestras

- Calidad del muestreo

8. Control de la calidad sanitaria del agua
9. Legislación
10. Aguas de consumo

- Aguas de consumo humano

- Aguas naturales envasadas

- Aguas preparadas envasadas

11. Aguas de baño

- Agua continental

- Aguas costeras y de transición

- Piscinas de uso colectivo

UNIDAD DIDÁCTICA 18. CONTROL DE LOS ALIMENTOS

1. Generalidades
2. Los alimentos como medio de cultivo
3. Conservación de los alimentos

- Técnicas de conservación basadas en la temperatura

- Conservación con aditivos

4. Microorganismos implicados
5. Enfermedades alimentarias

- Clasificación de las ETA

6. Muestreo y preparación de la muestra de los alimentos

- Preparación de la muestra

7. Análisis bacteriológicos de los alimentos
8. Legislación actualizada

- Legislación mundial

- Legislación europea

- Legislación española

9. Definiciones
10. Criterios microbiológicos para los productos de consumo
11. Los Programas Europeos DOP, IGP, ETG

UNIDAD DIDÁCTICA 19.CONTROL DE CALIDAD EN ANÁLISIS MICROBIOLÓGICOS

1. Criterios de calidad

- Introducción

- Control de la Calidad

- Manuales y Sistemas de Calidad en el Laboratorio (ISO 9000, ISO 17025, BPL, etc.)

2. Trazabilidad, aseguramiento de calidad y cálculos asociados

- Tratamiento general de la muestra pre-inoculación para cultivo de bacterias

- Cálculos asociados y aseguramiento de la calidad

3. Registro de resultados y emisión de informes

- Informes de laboratorio

UNIDAD DIDÁCTICA 20. ACTIVIDADES PRÁCTICAS

1. Actividad Práctica 1: Toma de muestras
2. Actividad Práctica 2: Microscopía
3. Actividad Práctica 3: Caso clínico
4. Actividad Práctica 4: Esterilización y desinfección
5. Actividad Práctica 5: Recuento de colonias bacterianas